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    凝膠電泳實驗中EB膠的危害及處理措施
    點擊次數:33159 更新時間:2010-08-08

    凝膠電泳實驗或其他核酸分離實驗中,常用EB(Ethidiumbromide,EtBr)作非放射性的Marker,來識別和顯示核酸條帶。EB是一種深紅色不易揮發的晶體,微溶于水。當被紫外線照射時能發出紅褐色的熒光。盡管EB是一種的顯色劑,但它的高危險性要求特殊的安全管理和回收流程。
    人體危害
    EB是一種強誘變劑(可能造成遺傳性危害),直接接觸有中等毒性。EB可以通過皮膚吸收,因此應當避免一切與EB的直接接觸。EB對皮膚,眼睛,口腔和上呼吸道系統有刺激性作用。應將EB安全密封,并密閉存放于干燥避光處。
    安全預防措施 良好的操作習慣可以降低危害接觸。
    在通風廚使用粉狀或結晶EB時,或使用含EB的溶液或片劑時,為避免吸入EB,應避免與EB的直接接觸。
    為避免皮膚接觸到溶液中的EB,應戴手套、實驗服和防護鏡,并勤換手套。
    要告知EB使用者EB的危險性、正確使用及回收方法。此外,經培訓的才能通過實驗室化學衛生管理計劃,獲得CHP(thelaboratory’s ChemicalHygiene Plan)的證書。擁有該證書者才算是按標準操作使用EB。
    在使用含EB類材料前需制訂一份EB安全使用說明。
    進入工作區域需佩戴防護鏡并確認有可使用的洗眼及淋浴設施。
    和其他化學藥品一樣,在EB的使用及放置房間內不準飲食。
    使用后脫去手套及時洗手,*處理掉殘留的EB。
    在使用UV照射EB時,戴上紫外線防護鏡或用紫外屏蔽玻璃以屏蔽。
    緊急處理措施
    誤入眼睛措施:如果EB不慎落入眼睛,立即用大量的冷水沖洗至少15分鐘。能用洗眼藥水進行擦洗。
    誤接觸措施:如果皮膚不慎接觸到EB,立即脫去被污染的衣物。再用肥皂清洗接觸到的皮膚后,大量的冷水沖洗至少15分鐘。
    誤服措施:如果不慎誤服或吸入EB,將受害者移至通風處,并及時送醫救治。
    泄漏污染處理:如果EB不慎灑落在水槽或者下水道,請立刻告知相關管理部門。如果大量EB灑落,應立即通知在該工作域的所有人員,將人員疏散并開始清理被污染的區域。在未清理好現場的同時,應豎牌警告他人勿入。并為有關部門提供資料及協作。
    若僅微量EB排入下水道并被及時發現,在確保安全的情況下可由實驗室熟知EB危害的人員進行清理。當然,清理EB的人員是必須經過安全培訓,并有防范意識和相應的處理裝置。如果實驗室的人員未經培訓或沒有處理裝置,請相關部門進行處理。
    凈化處理:在清理微量灑落的EB時,需全程穿著防護服(按上文所描述的“安全預防措施”)。用紫外燈照射確定污染的位置。EB的熒光是很容易看到的。如果灑落的EB是粉末狀,用濕紙巾擦拭后并按程序清理。如果灑落的是液體,用干紙巾吸干后再用UV光檢查殘余的EB,然后按程序清理。
    當準備或使用除污劑時配戴全面防護裝備(實驗服、手套和防護鏡)。在用EB前,需預先準備好除污劑:4.2克亞硝酸鈉(NaNO2,CAS # 7362-00-0)和20毫升的次磷酸(50%) (H3PO2, CAS# 6303-21-5),加入300毫升水。
    1)用紙巾蘸取去污劑擦洗被污染的區域,再用紙巾加自來水清洗5次,每次實用的紙巾都必須是干凈未污染的。
    2)用紫外光檢查已清洗的區域,以確保所有EB被清除。必要時可重復步驟1。如果酸可能損害被污染的表面,可用適量自來水稀釋去污劑后再使用。
    3)將所有使用過的紙巾用去污劑浸泡1小時,取出并將附著的去污劑擰干收回容器內。被處理時使用的手套和其他物件可雙層包裹再扔棄。
    4)在去污劑的容器上標上EB去污劑,并注明成分。將去污使用過的物件打包,后續處理程序如下。
    處理EB的其他方法
    凝膠電泳可改用低毒性的其他材料來替代EB(
    例如,可用SYBRSafeTM 對DNA凝膠染色),以減少在實驗室里可能發生的危險。處置EB的替代品也需有相應部門決定其處理方法后再做廢棄處理。如有任何疑問,請該部門。

    文章關鍵詞:凝膠電泳

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